W Desperados III znajduje się kilka typów przeciwników. Każdy z nich jest odporny na coś innego, ale również podatny na rozmaite umiejętności posiadane przez naszych bohaterów. Oto przegląd wszystkich rodzajów oponentów i ich zalet oraz wad, by jak najskuteczniej wykorzystywać ich słabości.

Gunman

Najbardziej podstawowy typ wroga. Nie jest odporny na żadną naszą umiejętność czy przedmiot, możemy z nim robić, co chcemy.

Gunwoman

Damski odpowiednik Gunmana. Nie jest to dokładna kopia męskie wersji cyngla, bowiem Gunwoman nie poddaje się urokowi Kate O’Hary – ani nie możemy jej uwieść, odciągając wzrok, ani flirtować, zaciągając w dowolne miejsce na mapie.

Poncho

Poważniejszy zawodnik w stosunku do wymienionych wyżej szeregowców. Przeciwnik noszący charakterystyczną, czerwoną narzutę, nie daje się tak łatwo podejść. Przede wszystkim nie zwabimy go torbą Doktora McCoya, ani gwizdaniem Hectora. Nie śledzi również naszych śladów w błocie.

Long Coat

Najpotężniejszy z przeciwników występujących w Desperados III. Z bliska jest go w stanie zabić tylko Hector. Żeby w ogóle go powalić innymi bohaterami, musimy najpierw strzelić z broni palnej, wtedy on zostaje ogłuszony na kilka sekund i dopiero wtedy staje się podatny na nasz atak. Wykazuje dużą odporność na torbę Doktora McCoya, gwizdanie Hectora. Ponadto jest w stanie rozpoznać Kate w przebraniu i ją zdemaskować. Niemniej jednak – w przeciwieństwie do Poncho – śledzi ślady bohaterów w błocie.

Pies

Zwierzę potrafi po zapachu wywąchać schowanego w zaroślach bohatera, ponadto rozpoznaje Kate w przebraniu.